مسترمیکس وان استپ برای پروب با راکس
ExcelRT One-Step RT-qPCR Kit(TaqMan, ROX)-RQ2110
کیت تک‌مرحله‌ای ExcelRT™ One-Step RT-qPCR Kit (TaqMan, ROX) کد RQ2110 کمپانی SMOBIO تایوان، سامانه‌ای کارآمد جهت سنتز cDNA و سنجش کمّی هم‌زمان بر پایه پروب‌های هیدرولیز TaqMan در یک میکروتیوب است که با بهره‌مندی از مهارکننده اختصاصی RNAok™، آنزیم هات‌استارت پرسرعت (فعال‌سازی در ۲ دقیقه) و رنگ مرجع ROX، تشخیصی دقیق و تکرارپذیر را فراهم می‌سازد.
تماس با کارشناسان
تیم تخصصی ما آماده پاسخگویی
توضیحات محصول
کیت تک‌مرحله‌ای ExcelRT™ One-Step RT-qPCR Kit (TaqMan, ROX) محصول کمپانی SMOBIO تایوان، سیستمی تخصصی و بهینه‌سازی‌شده برای رونویسی معکوس و سنجش کمّی Real-Time PCR به صورت تک‌مرحله‌ای (One-step) از اهداف RNA است. این کیت شامل دو جزء کلیدی One-Step RT Enzyme Mix و مستر میکس ۲ برابری 2X One-Step Master Mix است که تمامی مراحل سنتز رشته اول cDNA و تکثیر آن را درون یک لوله بدون نیاز به بازگشایی درب تیوب و افزودن معرف‌های ثانویه ممکن می‌سازد. مخلوط آنزیمی RT حاوی آنزیم مقاوم به حرارت ExcelRT™ Reverse Transcriptase به همراه مهارکننده قوی RNAok™ RNase Inhibitor است که فعالیت کاتالیزوری گسترده‌ای را در بازه دمایی ۴۲ تا ۶۰ درجه سانتی‌گراد ارائه داده و نمونه را در برابر انواع ریبونوکلئازها (شامل RNase A، RNase B و RNase C) محافظت می‌کند. بخش مستر میکس ۲ برابری حاوی یک آنزیم Hot-Start Taq DNA Polymerase با عملکرد سریع است که در کمتر از ۲ دقیقه فعال شده، از تشکیل پرایمر دایمرها ممانعت به عمل می‌آورد و انطباق کاملی با پروتکل‌های حرارتی سریع (Fast Cycling Programs) دارد. حضور رنگ مرجع پسیو ROX در فرمولاسیون نیز تضمین‌کننده نرمال‌سازی نوسانات نوری چاهک‌ها در پلتفرم‌های qPCR است. شرکت زیست‌فناوری پیشگام به‌عنوان نماینده رسمی و مستقیم SMOBIO در ایران، اصالت صددرصدی کالا و حفظ زنجیره سرمایی نگهداری آن را تا تحویل نهایی تضمین می‌نماید.
راهنمای راه‌اندازی واکنش و پروتکل حرارتی
اجزای کیت را پیش از راه‌اندازی واکنش بر روی یخ ذوب نموده و دور از تابش مستقیم نور قرار دهید. در یک میکروتیوب یا چاهک پلیت qPCR عاری از نوکلئاز، مقدار متناسب از 2X One-Step Master Mix و One-Step RT Enzyme Mix را با پرایمرهای اختصاصی فوروارد و ریورس، پروب نشان‌دار TaqMan، الگوی RNA (Total RNA یا mRNA) و آب عاری از نوکلئاز مخلوط کنید. مخلوط را به آرامی بدون ایجاد حباب پیپت نمایید (از ورتکس شدید پرهیز شود). پروتکل حرارتی شامل یک گام رونویسی معکوس (Reverse Transcription) در دمای ۴۲ الی ۶۰ درجه سانتی‌گراد (بسته به ساختارهای ثانویه RNA)، گام فعال‌سازی حرارتی فوق‌العاده سریع پلیمراز در دمای ۹۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۲ دقیقه، و سپس ۴۰ چرخه حرارتی شامل واسرشت‌سازی در ۹۵ درجه سانتی‌گراد و اتصال/امتداد توام با خوانش فلورسانس در دمای بهینه پرایمر و پروب (حدود ۶۰ درجه سانتی‌گراد) است.
کاربردها و زمینه‌های مصرف
این کیت تک‌مرحله‌ای انتخابی تخصصی برای پایش و سنجش سریع میزان بیان ژن‌ها (Gene Expression)، تشخیص زودهنگام و دقیق پاتوژن‌های ویروسی بر پایه RNA (نظیر آنفلوانزا، کرونا و هپاتیت C)، سنجش‌های تعیین بار ویروسی (Viral Load Quantification) در پلتفرم‌های تشخیصی و تحقیقاتی مجهز به رنگ مرجع ROX، و غربالگری‌هایی با حجم نمونه بالا با تکیه بر کاهش مراحل آماده‌سازی و ممانعت از آلودگی متقاطع است.
شرایط نگهداری و پایداری
کیت باید همواره در دمای منفی ۲۰ درجه سانتی‌گراد و کاملاً دور از تابش نور نگهداری شود. فرمولاسیون مستحکم این کیت به گونه‌ای تثبیت شده که تا ۳۰ چرخه متوالی انجماد و ذوب (Freeze-Thaw) را بدون افت کارایی و حساسیت تحمل می‌کند؛ با این حال جهت اطمینان از حفظ بالاترین کیفیت در شرایط آزمایشگاهی، آلیکوت کردن محلول‌ها پس از نخستین ذوب توصیه می‌شود. محصول در شرایط نگهداری استاندارد تا ۱۲ ماه کاملاً پایدار باقی می‌ماند.