مسترمیکس ریل تایم برپایه پروب تکمن - با راکس کم - برند امپلیکون
2x Real Time PCR Master Mix for probe-Low Rox A314402-25
مستر میکس ۲ برابری RealQ Plus 2x Master Mix for Probe, Low ROX (کد کاتالوگ A314402) محصول کمپانی Ampliqon دانمارک، یک معرف آماده مصرف با حساسیت و بازدهی بالا بر پایه آنزیم هات‌استارت اصلاح‌شده شیمیایی TEMPase است که با قابلیت مالتی‌پلکس هم‌زمان تا ۴ ژن هدف و حد تشخیص ۲ کپی، سنجش‌های کمّی Real-Time PCR بر پایه پروب را در سیستم‌های نیازمند Low ROX میسر می‌سازد.
تماس با کارشناسان
تیم تخصصی ما آماده پاسخگویی
توضیحات محصول
مستر میکس آماده مصرف RealQ Plus 2x Master Mix for Probe, Low ROX کد A314402 (بسته‌بندی ۴۰۰ واکنش شامل ۴ ویال ۱.۲۵ میلی‌لیتری) محصول کمپانی معتبر Ampliqon دانمارک، یک واکنش‌گر تک‌لوله‌ای بهینه‌سازی‌شده برای انجام سنجش‌های کمّی و کیفی Real-Time PCR بر پایه پروب‌های فلورسنت (مانند TaqMan) است. این مستر میکس حاوی تمامی اجزای ضروری شامل آنزیم پلیمراز هات‌استارت اصلاح‌شده شیمیایی TEMPase Hot Start DNA Polymerase، مخلوط dNTPs، سیستم بافری پیشرفته و غلظت کالیبره‌شده رنگ مرجع داخلی Low ROX می‌باشد. آنزیم TEMPase با ممانعت کامل از پلیمریزاسیون غیراختصاصی در دمای اتاق، اختصاصیت واکنش را به بالاترین سطح رسانده و پس از یک مرحله فعال‌سازی اولیه حرارتی، تکثیر دقیق الگو را آغاز می‌کند. ویژگی برجسته این محصول، ظرفیت انجام واکنش‌های چندگانه (Multiplexing) برای هم‌افزایی هم‌زمان تا ۴ توالی هدف DNA در یک تیوب است که موجب صرفه‌جویی چشمگیر در مواد مصرفی، زمان و نمونه‌های گرانبهای الگو می‌گردد. این کیت دارای بازه دینامیکی گسترده با حد تشخیص (LOD) حدود ۲ کپی (معادل ۰.۰۰۷ نانوگرم DNA ژنومی انسان) و حد سنجش کمّی (LOQ) حدود ۲۴ کپی است. فرمولاسیون Low ROX این محصول تطابق کاملی با سیستم‌های Real-Time PCR مطرح نظیر دستگاه‌های کمپانی Applied Biosystems (مدل‌های 7500، 7500Fast، ViiA 7 و سری QuantStudio) و Agilent (سری‌های Mx و AriaMx) دارد. شرکت زیست‌فناوری پیشگام به‌عنوان ارائه‌دهنده رسمی محصولات بیولوژی مولکولی در ایران، اصالت کامل این کالا و سلامت زنجیره سرمایی نگهداری آن را تا تحویل نهایی به آزمایشگاه‌ها و مراکز تشخیصی کشور تضمین می‌نماید.
راهنمای راه‌اندازی واکنش و پروتکل حرارتی
مستر میکس را روی یخ ذوب کرده و از چرخه‌های مکرر انجماد و ذوب بپرهیزید (پس از نخستین ذوب می‌توان باقیمانده را در ۴ درجه سانتی‌گراد نگهداری کرد). اجزای واکنش را برای حجم نهایی ۲۵ میکرولیتر به ترتیب زیر اضافه نمایید:
مستر میکس RealQ Plus 2x: مقدار ۱۲.۵ میکرولیتر (غلظت نهایی 1X)
پرایمر فوروارد (۱۰ میکرومولار): ۱ میکرولیتر (بازه ۰.۲۵ تا ۲ میکرولیتر، غلظت نهایی ۰.۴ میکرومولار)
پرایمر ریورس (۱۰ میکرومولار): ۱ میکرولیتر (بازه ۰.۲۵ تا ۲ میکرولیتر، غلظت نهایی ۰.۴ میکرومولار)
پروب (۱۰ میکرومولار): ۰.۵ میکرولیتر (بازه ۰.۱۲۵ تا ۰.۶۲۵ میکرولیتر، غلظت نهایی ۰.۲ میکرومولار)
آب گرید PCR: به میزان لازم تا رسیدن به حجم نهایی
DNA الگو: ۱ تا ۱۰۰ نانوگرم DNA ژنومی، ۰.۱ تا ۱ نانوگرم پلاسمید، یا ۱ تا ۱۰ نانوگرم DNA باکتریایی مخلوط را به آرامی و بدون ایجاد حباب پیپت نمایید (ورتکس نشود؛ وجود حباب سیگنال فلورسانس را مختل می‌سازد). پروتکل حرارتی دومرحله‌ای پیشنهادی (Two-step): ۱. فعال‌سازی حرارتی آنزیم TEMPase: دمای ۹۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه (۱ چرخه) ۲. چرخه‌های تکثیر (۴۰ چرخه): واسرشت‌سازی در ۹۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ الی ۳۰ ثانیه، و مرحله اتصال/امتداد و بازخوانی فلورسانس در ۵۵ الی ۶۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۶۰ ثانیه. (در صورت نیاز به پروتکل سه‌مرحله‌ای: واسرشت‌سازی در ۹۵ درجه ۱۵ تا ۳۰ ثانیه، اتصال پرایمر در ۵۵ تا ۶۵ درجه ۳۰ ثانیه و طویل‌سازی در ۷۲ درجه ۳۰ ثانیه تنظیم شود).
کاربردها و زمینه‌های مصرف
این مستر میکس انتخابی ایده‌آل برای سنجش‌های کمّی بیان ژن (Gene Expression Profiling)، سنجش بار ویروسی و باکتریایی در نمونه‌های تشخیصی، آزمون‌های چندگانه (Multiplex qPCR تا ۴ هدف) با فلوروفورهای مجزا، آنالیز ژنوتایپینگ و تمایز آللی (Allelic Discrimination)، و پژوهش‌های مبتنی بر پروب‌های TaqMan در پلتفرم‌های مجهز به سیستم اپتیکی Low ROX است.
شرایط نگهداری و پایداری
برای نگهداری بلندمدت، محصول باید در دمای منفی ۲۰ درجه سانتی‌گراد نگهداری شود. پس از نخستین ذوب، می‌توان مستر میکس مصرفی را تا ۳ ماه در دمای مثبت ۴ درجه سانتی‌گراد بدون افت کارایی نگهداری کرد. برای حفظ پایداری کامل نوری و آنزیمی، از قرار دادن معرف در معرض نور مستقیم و چرخه‌های مکرر انجماد و ذوب (Freeze-Thaw) خودداری فرمایید.