محلول تقویت کننده بتایینی
Betaine Enhancer
محلول افزاینده اختصاصی Betaine Enhancer Solution با غلظت ۵ مولار (کد A351104 / A351137) محصول کمپانی Ampliqon دانمارک، یک ادجوانت با کارایی فوق‌العاده جهت هم‌ترازسازی دمای ذوب توالی‌های غنی از AT و GC و کاهش دمای واسرشت‌سازی DNA است که با حذف ساختارهای ثانویه و جلوگیری از توقف آنزیم پلیمراز، تکثیر الگوهای ژنومی بسیار دشوار و سرشار از GC را میسر می‌سازد.
تماس با کارشناسان
تیم تخصصی ما آماده پاسخگویی
توضیحات محصول
محلول بهینه‌ساز و افزاینده Betaine Enhancer Solution با غلظت ۵ مولار (در بسته‌بندی‌های ۵ ویال ۱ میلی‌لیتری کد A351104، بطری ۱۰۰ میلی‌لیتری کد A351137 و ویال سمپل کد A351199) محصول کمپانی معتبر Ampliqon دانمارک، یکی از مؤثرترین و کارآمدترین افزودنی‌های واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) برای غلبه بر موانع تکثیر انواع الگوهای دشوار ژنتیکی، به‌ویژه توالی‌های سرشار از نوکلئوتیدهای گوانین و سیتوزین (GC-rich) و الگوهای دارای ساختارهای ثانویه متراکم (Secondary Structures) است. عملکرد بتائین در مقایسه با سایر افزودنی‌ها و افزاینده‌های سنتی نظیر DMSO، فرم‌آمید، TMAC، آلبومین سرم گاوی (BSA) و دترجنت‌های غیریونی، برتری چشمگیری نشان می‌دهد. سازوکار بیوشیمیایی بتائین بدین صورت است که با اتصال ترجیحی به شیار بزرگ (Major Groove) نواحی غنی از AT، سبب پایداری پیوندهای AT می‌شود و هم‌زمان اثری ناپایدارکننده و غیروابسته به توالی بر کل مولکول DNA اعمال می‌کند؛ این عملکرد دوگانه سبب می‌شود که اختلاف پایداری ناشی از پیوندهای دوتایی AT و سه‌تایی GC تعدیل شده و دمای ذوب (Tm) نواحی مختلف DNA به سطحی یکنواخت نزدیک و به طور کلی کاهش یابد. علاوه بر این، بتائین پردازش‌پذیری (Processivity) آنزیم‌های پلیمراز مقاوم به حرارت را ارتقا بخشیده و از توقف‌های ناخواسته (Pauses) پلیمراز و جدا شدن زودهنگام آن از روی الگو ناشی از گره‌های ثانویه ممانعت به عمل می‌آورد. شرکت زیست‌فناوری پیشگام به‌عنوان ارائه‌دهنده رسمی محصولات معتبر بین‌المللی در ایران، اصالت کامل این کالا و سلامت زنجیره سرمایی نگهداری آن را تا تحویل نهایی به جامعه دانشگاهی و پژوهشگران کشور تضمین می‌نماید.
راهنمای راه‌اندازی واکنش و پروتکل حرارتی
محلول استوک بتائین ۵ مولار است؛ برای استفاده در واکنش‌های PCR، معمولاً غلظت نهایی ۱ مولار (افزودن ۱۰ میکرولیتر بتائین به یک واکنش ۵۰ میکرولیتری) به عنوان نقطه شروع پیشنهاد می‌شود، هرچند برای برخی الگوهای بسیار مقاوم غلظت‌های ۱.۵ الی ۲ مولار نیز قابل بهینه‌سازی است. با توجه به اینکه بتائین دمای ذوب DNA و پرایمرها را کاهش می‌دهد، الزامی است که دمای واسرشت‌سازی (Denaturation) و دمای اتصال پرایمرها (Annealing) در برنامه حرارتی ترموسایکلر به میزان ۱ الی ۵ درجه سانتی‌گراد نسبت به شرایط معمول کاهش یابد. تعیین دقیق دمای اتصال بهینه باید به صورت اختصاصی برای هر جفت پرایمر انجام گیرد. جهت دستیابی به حداکثر راندمان، توصیه می‌شود ترکیب بافرهای مختلف (مانند بافر استاندارد آمونیومی یا Combination Buffer) را در حضور و عدم حضور بتائین آزمایش نمایید تا بهترین شرایط واکنش برای نمونه مورد نظر تعیین شود.
کاربردها و زمینه‌های مصرف
این محصول انتخابی ایده‌آل برای تکثیر توالی‌های ژنومی دشوار با درصد بسیار بالای GC (مانند جزایر CpG و پروموترها)، الگوهای دارای ساختارهای ثانویه متراکم و سنجاق‌سری (Hairpin loops)، واکنش‌های Long-range PCR با اهداف طویل و ساختارهای پیچیده، افزایش راندمان رونویسی معکوس و cDNA-PCR، و حذف باندهای غیراختصاصی یا اسمیرهای ناشی از توقف آنزیم است.
شرایط نگهداری و پایداری
برای نگهداری بلندمدت، محلول باید در فریزر و در دمای منفی ۲۰ درجه سانتی‌گراد حفظ شود و تا تاریخ انقضای مندرج روی محصول پایدار است. همچنین می‌توان ویال مصرفی را تا ۶ ماه در دمای مثبت ۴ درجه سانتی‌گراد در یخچال نگهداری کرد بدون آنکه افتی در کارایی بیوشیمیایی آن پدید آید.